Mistress America handler om den 18 år gamle Tracy, som netop er flyttet til New York for at gå på college. Der bliver vendt op og ned på hendes liv, da hun lærer den selvsikre Brooke at kende. Brooke fører et hektisk liv og giver udtryk for, at hun kan klare enhver situation, men efterhånden som Tracy lærer hende at kende, begynder hendes facade at krakelere.