Hiljattain perustettu Guardians of the Galaxy löytää salaperäisen aarrekartan, joka johtaa galaksin voimakkaimman aseen, kosmisen siemenen, luo. Sankarien pitää löytää siemen, suojella sitä ja lopulta tuhota se, jotta se ei päätyisi niiden käsiin, jotka yrittäisivät käyttää siemenen voimaa väärin. Näitä pahantekijöitä ovat galaksin suurroisto Thanos, henkiin herätetty Ronan ja kiero kujeilija Loki. Reitti siemenelle kulkee uusien ja ennestään tuttujen planeettojen kautta, ja Guardiansin jäsenet selvittävät matkalla menneisyyden salaisuuksiaan. Aarrejahti vie joukon lopulta Maahan, jonne päätyy sankarien ohella myös universumin tuhoisimmat voimat.