Barndomsvennerne Doug (Jack Black) og Griff (Paul Rudd) kaster sig endelig ud i deres længe nærede drøm om at genindspille deres yndlingskultklassiker, Anaconda, i Amazonas' dybder. Men kaoset bliver alvor, da en ægte kæmpeanaconda dukker op og forvandler deres komiske filmoptagelse til en dødsensfarlig situation. Filmen, de brænder for at lave? Den kan ende med at koste dem livet...