Godine 1938. kolekcionar umjetnina obraća se uglednom arheologu dr. Indiani Jonesu da krene u potragu za Svetim Gralom. Indy saznaje da je srednjovjekovni istoričar nestao dok je tražio taj brod, a nestali čovjek je njegov vlastiti otac, dr. Henry Jones stariji. Kreće da spasi oca prateći tragove iz starčeve bilježnice, koju mu je otac poslao prije nego što je nestao. Indy stiže u Veneciju, gdje traži pomoć od prelijepe akademkinje, dr. Else Schneider, zajedno sa Marcusom Brodyjem i Sallahom. Zajedno moraju zaustaviti naciste da povrate moć vječnog života i preuzmu svijet!